Набор реагентов для определения активности антитромбина III хромогенным методом (Реахром-АТIII)

Набор реагентов для определения активности антитромбина III хромогенным методом (Реахром-АТIII) по ТУ 21.20.23-062-05595541-2017 предназначен для количественного определения активности антитромбина III в плазме крови хромогенным методом как вручную, так и на автоматических анализаторах.

Антитромбин III (ATIII) или ко-фактор гепарина – основной антагонист тромбина при образовании этого фермента в крови. Наследственный и приобретенный дефицит АТIII в крови приводит к развитию диссеминированного внутрисосудистого свертывания и в некоторых случаях острых тромбозов. Сниженная концентрация АТIII наблюдается у больных с заболеваниями печени (при циррозе), с нефротическим синдромом в результате экскреции ингибитора с мочой. Концентрацию АТIII снижают инъекции гепарина и оральные контрацептивы.

Принцип метода:

Метод определения активности АТIII основан на способности АТIII нейтрализовать тромбин в присутствии гепарина. Активность АТIII определяют в плазме, добавляя к ней избыток тромбина. При этом происходит ингибирование тромбина комплексом АТIII-гепарин пропорционально количеству АТIII в плазме. Оставшееся количество тромбина катализирует отщепление пара-нитроанилина (рNА) от синтетического хромогенного субстрата. Абсорбция свободного pNA, определяемая при 405 нм, обратно пропорциональна активности АТIII.

Процесс идет по следующей схеме:

• АТIII + гепарин (избыток) ⇒ АТIII-гепарин.
• АТIII-гепарин + тромбин (избыток) ⇒АТIII-гепарин-тромбин + тромбин (остаток).
• Субстрат-рNA + тромбин (остаток) ⇒ Пептид + рNA.

Для построения калибровочного графика используют плазму-калибратор с известной активностью АТIII (А). На оси ординат (Y) по линейной шкале откладывают величины оптической плотности, полученных для каждого разведения плазмы-калибратора, а на оси абсцисс (Х) по линейной шкале — активность антитромбина III в %.

Используя калибровочный график и значение времени свертывания исследуемого образца определяют активность АТIII в %.

Состав набора:

• Тромбин человека с гепарином, лиофильно высушенный (20 МЕ/фл.) – 2 флакона;
• Плазма-калибратор, лиофильно высушенная (1 мл/фл.) – 1 флакон;
• Хромогенный субстрат, лиофильно высушенный (4 мкМ/фл.) – 2 флакона;
• Буфер имидазоловый концентрированный (5 мл/фл.) – 1 флакон.

Один набор предназначен для проведения 40 определений ручным методом, 60 определений на коагулометрах Sysmex и 80 определений на коагулометрах ACL. Количество анализов на других автоматических анализаторах зависит от конструкции прибора.

Нормальные и патологические значения активности антитромбина III следует контролировать с помощью Плазмы контрольной, Артикул КМ-2.